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本文標(biāo)題:光鏡顯微鏡下觀測(cè)過(guò)氧化物酶的化學(xué)反應(yīng)步驟

信息分類:信息交流　新聞來(lái)源：未知發(fā)布時(shí)間：2016-1-30 16:33:39

光鏡顯微鏡下觀測(cè)過(guò)氧化物酶的化學(xué)反應(yīng)步驟

操作步驟

(1)用3%戊二醛固定液固定不同時(shí)間的各類切片，用配固

定液的緩沖液漂洗。充分漂洗可使線粒體的內(nèi)源性細(xì)胞色素C流

失，抑制夾雜反應(yīng)。

(2)在孵育液中37°C壁光反應(yīng)20-60min.

(3)用0.05mol壓緩沖液(含6.5%蔗糖)漂洗。

(4)光鏡直接觀察。電鏡用1.5%亞鐵氰化鉀一1%鋨酸后固定，

常規(guī)電鏡包埋、切片、觀察。

對(duì)照

(1)固定方法不同可顯示不同的過(guò)氧化物酶，固定時(shí)間長(zhǎng)，

抑制過(guò)氧化氫酶，顯示髓過(guò)氧化物酶等酶的活性。

(2)孵育液中加50mmol/L氰化鉀抑制中性粒細(xì)胞的過(guò)氧化

物酶，選擇性顯示嗜酸粒白細(xì)胞的髓過(guò)氧化物酶。

(3)熱抑制大部分過(guò)氧化物酶。